Servicios

CUANTIFICACIÓN HORMONAS VEGETALES

Personal

  • Esther Carrera Bergua · Responsable del Servicio
  • Teresa Sabater Gimeno · Técnico del Servicio
  • La puesta en marcha de este servicio fue realizada por Jose Luis García Martínez, Profesor de Investigación en el IBMCP, actualmente jubilado.

Contacto

hormonas@ibmcp.upv.es

Descripción

CUANTIFICACIÓN DE HORMONAS VEGETALES

El Servicio de Cuantificación de Hormonas Vegetales realiza la cuantificación de las hormonas mediante un equipo de UHPLC-espectrometría de masas (Q-Exactive, ThermoFisher Scientific) instalado en el IBMCP, capaz de cuantificar hormonas vegetales en muestras de solo 50 mg de materia fresca y concentraciones por debajo de 0,1 ng/g. Hasta la fecha, este servicio ha realizado análisis de giberelinas (GAs), auxinas (IAA), acido jasmónico (JA), acido salicílico (SA), acido abscísico (ABA) y citoquininas (CKs) para un gran número de grupos de investigación de la comunidad científica española y ha establecido colaboraciones con grupos de otros países.

Hormonas analizadas en el servicio:

 

  • Hormonas ácidas (ionización en modo negativo):

    • Giberelinas activas: GA1 y GA4
    • Otras hormonas ácidas. Incluye el ácido indol-3-acético (IAA), ácido abscísico (ABA), ácido jasmónico (JA) y ácido salicílico (SA)
    • Otras giberelinas (incluyendo precursores y GAs inactivas) hasta un total de 14 GAs de las rutas de biosíntesis de GA1 (GA1, GA20, GA19, GA44, GA53, GA29 y GA8) y GA4 (GA4, GA9, GA24, GA15, GA12, GA51 y GA34).

 

  • Hormonas básicas (ionización en modo positivo):
    • Citoquininas (CKs).  Incluye: dihidrozeatina (DHZ), isopenteniladenina (iP) y t-zeatina (tZ).

 

Condiciones del Servicio

Para solicitar los análisis de hormonas el peticionario debe solicitar presupuesto al Servicio de Cuantificación de Hormonas del IBMCP por correo electrónico (hormonas@ibmcp.upv.es) especificando el tipo de material, número de muestras y hormonas a analizar, Una vez aceptado el presupuesto se le informara de los siguientes pasos a seguir. Nuestro equipo, solo realiza cuantificación de hormonas, con carácter de servicio, para instituciones públicas españolas. En el caso de instituciones fuera de este ámbito, solo nos planteamos el análisis de hormonas en el marco de una colaboración científica.

Los solicitantes del IBMCP deben entrar en contacto con el laboratorio 2.06 y rellenar la Hoja de Solicitud y el Boletín de Material para Analizar, que deberan presentar junto con las muestras.

 

Documentos

 

Normas - Solicitudes - Tarifas

¿Qué procedimiento hay que seguir para solicitar los análisis de hormonas?

boletinmaterialanalizar.xls

  • 1. El Peticionario debe solicitar presupuesto, especificando el tipo de material, número de muestras y hormonas a analizar, al servicio de Cuantificacion de Hormonas.
  • 2. El Servicio enviara al Peticionario un presupuesto de los análisis solicitados.
  • 3. Los Peticionarios Externos enviarán a continuación la Hoja de Encargo (aceptando el presupuesto y comprometiéndose al pago de los costes de análisis) junto con las muestras acompañadas del Boletin de material a analizar.
  • 4. Una vez realizados los análisis, el Servicio de Cuantificación de Hormonas enviará al peticionario un Informe de Resultados acompañado de una Nota de Entrega, que deberá devolver firmada.
  • 5. El Servicio emitirá a continuación una Factura por el importe comprometido y aceptado para que el Peticionario proceda a su pago mediante transferencia bancaria.

¿Cómo debe enviarse el material a analizar?

  • El material (entre 100 y 200 mg de tejido fresco o una cantidad inferior a 30 mg de pesos seco para material liofilizado) debe enviarse bien triturado y pesado en balanza de precisión en viales de fondo redondo (que reducen las pérdidas de material durante la extracción), mediante transporte adecuado (en hielo seco en caso de material congelado). Los tubos deben venir claramente rotulados con la numeración que el propio Servicio de Cuantificación de Hormonas suministrará cuando se hace la solicitud de cuantificación. Para obtener resultados estadísticamente significativos, se recomienda enviar de tres a cinco replicas biológicas.

- Los impresos mencionados, necesarios para solicitar los análisis de hormonas, pueden descargarse picando en los nombres correspondientes.

Equipamiento

El equipamiento del Servicio de Cuantificación de Hormonas se compone de dos partes ubicadas ambas en el IBMCP.

  • A. Instrumentación para la extracción y purificación de hormonas:
    • un Mixer-Miller 400,
    • un Equipo de filtración SPE
    • y un Rotovapor.

     

     

    • B. Instrumentación para los analisis de hormonas:

       

      • Espectrómetro de masas Q-Exactive acoplado a un cromatógrafo liquido UHPLC (Ultra HighPerformance Liquid Chromatography)
        • El Q-Exactive, instalado en el Laboratorio de Cromatografía del IBMCP, es un espectrómetro de masas con un analizador Orbitrap de alta resolución y exactitud de masa. La generación de iones se produce en la fase líquida procedente del UHPLC mediante ionización por electrospray (ESI) a presión atmosférica (API). La concentración mínima de hormona cuantificable con el Q-Exactive es de unos 0.01 pg/μL de solución inyectada, que es de 10 μL
      • un inyector automático AS (autosampler)
      • un generador de N2